L02肝細胞

簡要描述：L02肝細胞
種屬：人；貼壁生長；生長周期：3~4天
疾病特征: 正常

細胞形態(tài): 上皮細胞樣

生長特性: 貼壁生長

培 養(yǎng) 基: RPMI-1640,90%;FBS,10%。

生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃,

傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。

產品型號： YKL-L02

所屬分類：細胞庫

更新時間：2024-04-29

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L02肝細胞

L02肝細胞

疾病特征:         正常

細胞形態(tài):         上皮細胞樣

生長特性:         貼壁生長

培 養(yǎng) 基:         RPMI-1640,90%;FBS,10%。

生長條件:         氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37 ℃,

傳代方法:         1:2至1:6,每周2次。

凍存條件:         90% 培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲存

支原體檢測:       陰性

特點和簡介

L-02細胞建系鑒定于1980年。該細胞是一株正常肝細胞系,具有典型的肝細胞形態(tài)學特征,可用于多種實驗研究。

接受后處理

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。

2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。

3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的培養(yǎng)基。

4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的培養(yǎng)基。

5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián)系。

培養(yǎng)操作

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;

1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1mYM,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數。

2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據細胞數量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。

3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。